色譜儀如果出現(xiàn)色譜柱的保留時(shí)間改變，那么就需要考慮液相色譜是否有損壞。

　　保留時(shí)間變化有兩種情況：第一種是同一根柱樣品間的保留變化;第二種是不同柱之間的保留變化。第二種類型主要是填料的差異造成的，許多實(shí)驗(yàn)室都會(huì)碰到。

　　不同牌號(hào)的液相色譜儀色譜柱分離的色譜峰包里時(shí)間可能在一定范圍內(nèi)移動(dòng)，但通常峰的順序和分辨率不變，可通過(guò)調(diào)整流速或溶劑強(qiáng)度進(jìn)行校正，如果譜圖中色譜峰順序發(fā)生了變化，或者兩峰重疊在一起，問(wèn)題就比較嚴(yán)重，最好更換原來(lái)品牌的色譜柱。

　　保留時(shí)間發(fā)生大的變化，主要由柱填料硅醇基相互作用或者比表面積、碳含量差異較大所致，另外有次級(jí)保留因素的影響。硅膠為基質(zhì)的填料表面含有硅醇，有的封尾填料可去掉硅醇，不封尾填料的硅膠表面硅醇基更多。酸性或堿性分子可與硅醇基發(fā)生不同程度的相互作用。

　　硅醇基與樣品分子作用的強(qiáng)弱，因不同批號(hào)的硅膠和不鍵合相填料而異。即使同批號(hào)的硅膠而不同批號(hào)的鍵合相也有差異。硅醇基對(duì)陽(yáng)離子或堿性樣品影響最大。