溶劑按化學(xué)組成分為有機(jī)溶劑和無(wú)機(jī)溶劑，而波譜中的應(yīng)用中常用的是有機(jī)溶劑。有機(jī)溶劑是一大類在生活和生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用的有機(jī)化合物，分子量不大，常溫下呈液態(tài)。溶劑效應(yīng)是指溶劑對(duì)于反應(yīng)速率，平衡甚至反應(yīng)機(jī)理的影響。溶劑對(duì)化學(xué)反應(yīng)速率常數(shù)的影響依賴于溶劑化反應(yīng)分子和相應(yīng)溶劑化過渡態(tài)的相對(duì)穩(wěn)定性。

　　溶劑效應(yīng)在液相色譜中的影響

　　在液相色譜中樣品溶液的溶劑強(qiáng)度強(qiáng)于流動(dòng)相溶劑強(qiáng)度時(shí)可能會(huì)造成的峰展寬、峰分叉現(xiàn)象。

　　主要表現(xiàn)為色譜圖上較早洗脫的峰扭曲變形或者開叉，與此同時(shí)較晚洗脫的峰則較為尖銳與對(duì)稱，這些現(xiàn)象顯示一個(gè)比較特殊的起因――樣品溶液的溶劑很可能強(qiáng)于流動(dòng)相。例如樣品溶液的溶劑是100%乙腈(100%的強(qiáng)溶劑)，而流動(dòng)相的組成則較弱，18%的乙腈與72%的水。第一個(gè)峰是開叉的，并且與第二個(gè)峰相比，明顯地變寬了。當(dāng)樣品溶液的溶劑變成流動(dòng)相時(shí)，所有的峰形都改善了，且變得尖銳。

　　當(dāng)樣品進(jìn)樣時(shí)，有可能出現(xiàn)峰展寬，最佳的樣品溶液組成和體積將會(huì)保持在10%甚至更低，在這個(gè)例子里，當(dāng)樣品溶劑與流動(dòng)相溶劑強(qiáng)度不同時(shí)，換句話來說，也就是樣品未用流動(dòng)相溶解，因此，有些樣品分子溶解在強(qiáng)溶劑(100%ACE)，并隨強(qiáng)溶劑流過柱子，而有些則溶解在流動(dòng)相中，從而導(dǎo)致峰分叉。

　　當(dāng)樣品與流動(dòng)相強(qiáng)度相差較小，進(jìn)樣影響也會(huì)小，第一個(gè)峰可能會(huì)寬于第二個(gè)峰，而當(dāng)這種展寬導(dǎo)致必要的分離度降低時(shí)，這樣情況應(yīng)引起注意，例如使用一根短柱，和5UL進(jìn)樣，這與最佳進(jìn)樣體積4UL相近，用了極性更強(qiáng)的溶劑導(dǎo)致分離度明顯的降低。

　　避免液相色譜出現(xiàn)這類問題的方法

　　盡量用流動(dòng)相來溶解樣品，對(duì)于梯度洗脫，采用初始的流動(dòng)相比例。對(duì)于在流動(dòng)相中溶解度小，必須用強(qiáng)溶劑的時(shí)候，減少進(jìn)樣體積以消除溶劑效應(yīng)的影響。